乳及乳制品中乳酸菌的测定的操作步骤

admin2018-09-12  28

问题 乳及乳制品中乳酸菌的测定的操作步骤

选项

答案1)以无菌操作将经过充分摇匀的检样25mL(g)放入盛有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内作成1:10的均匀稀释液。 2)用1mL灭菌吸量管吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有灭菌生理盐水的试管内(注意吸量管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀。 3)另取l mL灭菌吸量管,按上述操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增一次,即换用1支1 mL灭菌吸量管。 4)选择2~3个以上适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸量管移1 mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。 5)稀释液移入平皿后,应及时将15mL冷却至50℃的乳酸菌计数培养基(改良TJA或改良MC)注入平皿,并转动平皿使其混合均匀。同时将乳酸菌计数培养基倾人加有1 mL稀释液检样用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内做空白对照,以上整个操作自培养基加入培养皿开始至接种结果须在20min内完成。 6)待琼脂凝固后,翻转平板,置于3 6℃±1 CC温箱内培养7 2 h±3 h,观察乳酸菌菌落特征(见表4.3),选取菌落数在30~300之间的平板进行计数。计算后,随机挑取5个菌落数进行革兰氏染色,用显微镜检查并做过氧化氢酶试验。革兰氏阳性,过氧化氢酶阴性,无芽孢的球菌或杆菌可定为乳酸菌。根据被证实的乳酸菌菌落计算出该皿内的乳酸菌数,然后乘其稀释倍数即得每毫升样品中的乳酸菌数。例如,检样10-4的稀释液在改良TJA琼脂平板上,生成的可疑菌落为35个,取5个鉴定,证实为乳酸菌的是4个,则1mL检样中乳酸菌数为: 35×4/5×104个=2.8×lO5个 7)乳酸菌在改良TJA和改良MC培养基上菌落生长形态特征具体见表4—3。 [*]

解析
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