某酶制剂的比活力为42单位/毫克蛋白,每毫升含12 mg蛋白质,计算当底物浓度达到饱和时,1mL反应液中含:(1)20μL酶制剂;(2)5μL酶制剂时的反应初速度(单位为国际活力单位);(3)该酶制剂在使用前是否需要稀释?

admin2019-08-28  37

问题 某酶制剂的比活力为42单位/毫克蛋白,每毫升含12 mg蛋白质,计算当底物浓度达到饱和时,1mL反应液中含:(1)20μL酶制剂;(2)5μL酶制剂时的反应初速度(单位为国际活力单位);(3)该酶制剂在使用前是否需要稀释?

选项

答案每毫升酶制剂含有42×12=504.活力单位 (1)20μL酶制剂含有2.0×10-3×504=10.08活力单位,酶促反应速度为:10.08μmol/(mL.min); (2)5μL,酶制剂含有5×10-3×504=2.52活力单位,酶促反应速度为:2.52μmol/(mL.min); (3)一般情况下,酶制剂都应当稀释,以便在适当的试验期间底物不被过分消耗,例如:10 min内,1 mL反应液内含5μL酶制剂,消耗的底物为:2.52×10-3mol/(mL.min)×10 min=2.52×10-2 mol/L 所以,为了确保底物的消耗低于5%,必须使[S]>0.5mol/L。如此大的底物浓度实际上是较难达到的,因此酶制剂在使用前应当稀释。

解析
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