2. 医学
  3. 指出在pH 2．5、pH 3．5、pH 6、pH 8、pH 11．4时，四种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的比较)，并回答以下问题： (1)电泳分离四种核苷酸时，缓冲液应取哪个pH比较合适?此时它们是向哪一极移动?移动的快慢顺序如何?

指出在pH 2．5、pH 3．5、pH 6、pH 8、pH 11．4时，四种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的比较)，并回答以下问题： (1)电泳分离四种核苷酸时，缓冲液应取哪个pH比较合适?此时它们是向哪一极移动?移动的快慢顺序如何?

admin2019-08-28  48
问题 指出在pH 2．5、pH 3．5、pH 6、pH 8、pH 11．4时，四种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的比较)，并回答以下问题：
    (1)电泳分离四种核苷酸时，缓冲液应取哪个pH比较合适?此时它们是向哪一极移动?移动的快慢顺序如何?
    (2)当要把上述四种核苷酸吸附于阴离子树脂柱上时，应调pH到多少?
    (3)如果用洗脱液对限离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱分离时，洗脱液应调pH到多少?这四种核苷酸上的洗脱顺序如何?为什么?
选项
答案各种核苷酸带电荷情况如表所示： [*] (1)电泳分离四种核苷酸时应取pH 3．5的缓冲液，在该pH时，这四种单核苷酸之间所带负电荷差异较大，它们都向正极移动，但移动的速度不同，依次为：UMP＞GMP＞AMP＞CMP。 (2)应取pH 8，这样可使各核苷酸带较多负电荷，利于核苷酸吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11．4时核苷酸带有更多的负电荷，但pH过高对树脂不利。 (3)洗脱液应调到pH 2．5，当不考虑树脂的非极性吸附时，洗脱顺序为MPT＞AMP＞GMP＞UMP(根据pH 2．5时核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度)，但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附，嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为：CMP＞AMP＞UMP＞GMP。
解析
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