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  3. 下列关于碱裂解法的说法，哪项是错误的?( )

下列关于碱裂解法的说法，哪项是错误的?( )

admin2017-12-11  0
问题 下列关于碱裂解法的说法，哪项是错误的?(  )
选项 A、简单、重复性好
B、pH13．0～13．6
C、在高钾盐条件下，可有效沉淀蛋白质
D、用无水乙醇沉淀质粒DNA
答案B
解析 碱裂解法简单、重复性好而且成本低，是使用最广泛的方法。在NaOH提供的高pH(12．0～12．6)条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁，裂解细胞与NaOH共同使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。尽管碱液能破坏核酸的碱基配对，但CCC质粒DNA因缠结紧密而不会解链，只要不在碱性条件下变性太久，当pH调至中性时，CCC质粒DNA就可重新恢复其天然状态。裂解后，细胞壁碎片与变性的蛋白质和染色体DNA形成大的复合物，这些复合物在高钾盐条件下，可有效沉淀，而质粒DNA保留于上清中。直接通过无水乙醇沉淀质粒DNA，并用70％的乙醇洗涤，其纯度可满足DNA测序与PCR等实验的要求。碱裂解法是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠杆菌(E.coli)菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。
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