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聚合酶链反应(PCR)目的是

admin2014-07-30  58
问题 聚合酶链反应(PCR)目的是
选项 A、测定基因碱基组成与退火之间的关系
B、测定基因碱基组成与变性之间的关系
C、扩增基因片段
D、将大量DNA片段变性
E、将大量DNA片段退火
答案C
解析 聚合酶链反应(PCR)：(1)PCR技术采用特异性的引物，能特异性地扩增出目的DNA片段。(2)由于在基因顺序中突变区两侧的碱基序列和正常基因仍然相同，因此，根据待测基因两端的DNA序列设计出一对引物，经PCR反应将目的基因片段扩增出来，即可进一步分析判断致病基因的存在与否，并了解其变异的形式。(3)PCR反应体系中有：模板DNA、一对引物、嗜热的DNA聚合酶(一般为Taq DNA聚合酶)、4种dNTP(底物)、缓冲液。(4)引物是根据需要扩增的DNA序列(靶DNA)的3’端设计并合成的，两个引物(长约20个核苷酸)分别互补于模板DNA的两条链，方向相对。(5)PCR反应大约需要30个循环，每个循环的反应有3步：①变性(约94℃)，高温变性，双螺旋解离成单链；②退火(约55℃)，一对引物分别和两条模板链的3’端互补；③延伸(约72℃)，在模板的指导下，Taq DNA聚合酶从每个引物的3’端开始合成一条新链。经过约30个循环以后，靶DNA的拷贝数一般可以扩增10。倍(理论上108倍)。(2003)
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