某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后，与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到

admin2020-10-28 38

问题某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中会导致相应的基因失活(Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后，与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
回答下列问题：

如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_________；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是_________。

选项

答案二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长；二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长

解析依题意可知，目的基因插入位点在Tet^r中，导致四环素抗性基因(Tet^r)失活，而氨苄青霉素抗性基因(Amp^r)仍能行使正常功能。如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞，因二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长，所以是不能区分的。含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞，因二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都能生长，因此也是不能区分的。

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生物学科知识与教学能力

教师资格

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