某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混

admin2019-09-20 57

问题某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中会导致相应的基因失活(Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_______ ；并且_______和_______的细胞也是不能区分的，其原因是_______。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有_______的固体培养基。

选项

答案二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长；含有质粒载体；插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)；二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长；四环素

解析

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