乳及乳制品中乳酸菌的测定的操作步骤

admin2018-09-12 52

问题乳及乳制品中乳酸菌的测定的操作步骤

选项

答案1)以无菌操作将经过充分摇匀的检样25mL(g)放入盛有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内作成1：10的均匀稀释液。 2)用1mL灭菌吸量管吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有灭菌生理盐水的试管内(注意吸量管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀。 3)另取l mL灭菌吸量管，按上述操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增一次，即换用1支1 mL灭菌吸量管。 4)选择2～3个以上适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸量管移1 mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。 5)稀释液移入平皿后，应及时将15mL冷却至50℃的乳酸菌计数培养基(改良TJA或改良MC)注入平皿，并转动平皿使其混合均匀。同时将乳酸菌计数培养基倾人加有1 mL稀释液检样用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内做空白对照，以上整个操作自培养基加入培养皿开始至接种结果须在20min内完成。 6)待琼脂凝固后，翻转平板，置于3 6℃±1 CC温箱内培养7 2 h±3 h，观察乳酸菌菌落特征(见表4．3)，选取菌落数在30～300之间的平板进行计数。计算后，随机挑取5个菌落数进行革兰氏染色，用显微镜检查并做过氧化氢酶试验。革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，无芽孢的球菌或杆菌可定为乳酸菌。根据被证实的乳酸菌菌落计算出该皿内的乳酸菌数，然后乘其稀释倍数即得每毫升样品中的乳酸菌数。例如，检样10^-4的稀释液在改良TJA琼脂平板上，生成的可疑菌落为35个，取5个鉴定，证实为乳酸菌的是4个，则1mL检样中乳酸菌数为： 35×4／5×10⁴个=2．8×lO⁵个 7)乳酸菌在改良TJA和改良MC培养基上菌落生长形态特征具体见表4—3。 [*]

解析

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